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分子检测实验室的压力要求
信息来源:   发布时间:2018-10-20   浏览:

a 试剂贮存和准备区
主要功能:原装试剂和配制试剂的贮存,所有试剂的配制与分装。
工作区域的压力要求:未设缓冲间的试剂贮存和准备区,工作区域为正压。
注意事项:当试剂经质检合格后,应将其分装贮存备用,贮存试剂的分装体积根据通常在实验室内一次测定所需的扩增反应数决定。用于扩增的试剂应冰冻贮存。
b 样品制备区
主要功能:实验室样品的混样和测试样品的制备。
工作区域的压力要求:未设缓冲间的样品制备区,工作区域为负压或减压,可安装排风系统。
注意事项:此区应远离其它实验操作区;粉碎样品时的器皿应单独使用,所用的器具在使用前应经过彻底清洗并高压消毒,防止交叉污染;称取的测试样品应加盖后再移至样品核酸制备区。
c 核酸制备区
主要功能:核酸的提取纯化与贮存;核酸含量的测定;测试样品DNA的保存。
工作区域的压力要求:未设缓冲间的核酸制备区,工作区域为负压或减压,可安装排风系统。
注意事项:已纯化的核酸应保存于-20℃或-80℃,避免反复冻融;阳性和阴性标准物质DNA可调整至常用的使用浓度后分装并冷冻保存
d 扩增区
主要功能:PCR扩增反应体系的配制和模板的加入,核酸扩增。
工作区域的压力要求:未设缓冲间的扩增区,工作区域为负压或减压,可安装排风系统。
注意事项:严格限制无关人员出入并减少在本区内走动;加样应在超净工作台(生物安全柜)内进行,超净工作台的气流方向宜选择垂流式;巢式PCR的第二次加样必须在此区进行。
e 扩增产物分析区
主要功能:扩增产物的测定
工作区域的压力要求:未设缓冲间的扩增产物区,工作区域为负压或减压,应安装排风系统。
注意事项:此区是最主要的扩增产物污染来源,应远离其它实验操作区;使用PCR-ELISA方法检测扩增产物时,应使用洗板机洗板。
若实验仅采用全自动扩增检测仪(如实时荧光定量PCR仪),可将扩增区与扩增产物分析区合并为一个区。

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